诱导多能干细胞有饲养层的培养方法及应用

基本信息

申请号 CN202111431208.5 申请日 -
公开(公告)号 CN114196621A 公开(公告)日 2022-03-18
申请公布号 CN114196621A 申请公布日 2022-03-18
分类号 C12N5/074(2010.01)I;C12N5/077(2010.01)I;A01K67/027(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 江斌;熊忠贤;熊琼琼 申请(专利权)人 江西中洪博元生物技术有限公司
代理机构 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 刘召民
地址 330052江西省南昌市南昌县小蓝经济技术开发区小蓝中大道346号16栋
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了诱导多能干细胞有饲养层的培养方法及应用,培养方法包括:1)在培养瓶中加入明胶,摇匀覆盖底面,放于37℃培养箱至少15min,加入事先水浴加热至37℃的MEF完全培养液,将复苏的MEF饲养层细胞制成单细胞悬液并传代至P3代,加入到培养瓶中;2)将复苏的iPS细胞制成单细胞悬液,转移至铺好MEF饲养层细胞的培养板中,置于37℃,5%CO2培养箱继续培养;3)将传代培养的iPS细胞用0.125%的胰酶消化细胞后,用不含MEF的小鼠胚胎干细胞培养液制成单细胞悬液,接种在0.1%明胶预先包被的培养皿中,37℃孵育50min去除MEF后,将上液移入培养板中培养,以制备EBS拟胚体。