一种高效表达工程菌重组蛋白的方法及应用

基本信息

申请号 HK14110717.5 申请日 -
公开(公告)号 HK1197265A 公开(公告)日 2015-01-09
申请公布号 HK1197265A 申请公布日 2015-01-09
分类号 C12N;C07K;C12R 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 丘小庆 申请(专利权)人 畿晋庆三联(北京)生物技术有限公司
代理机构 香港知识产权代理有限公司 代理人 畿晋庆三联(北京)生物技术有限公司
地址 中国内地/中国 北京市海淀区 苏家坨镇前沙涧村东1000米
法律状态 -

摘要

摘要 提供高度的方法表达重组蛋白的工程菌和用途。该方法包括以下步骤:(1)对大肠杆菌工程菌与PET系统转染重组突变质粒中得到阳性单克隆菌落;(2)阳性单克隆菌落富集,得到种子菌液,和种子菌液诱导到富集与生长在大量;和(3)含有该重组蛋白的细菌上清液为表达目标arated,和将该重组菌提取上清液中的蛋白质和纯化。该方法其特征在于:所述的工程菌大肠杆菌E。coli b834与PET系统(DE3)。质量的成分富集培养基,蛋白纯化步骤也优化,使得显著的改进在实现蛋白的收率和纯度,该方法适合应用到大型生产重组蛋白表达的大肠杆菌工程菌