人蛋白基因Notch3胞内片段克隆载体及其制备方法和应用

基本信息

申请号 CN201810371944.8 申请日 -
公开(公告)号 CN108546707A 公开(公告)日 2018-09-18
申请公布号 CN108546707A 申请公布日 2018-09-18
分类号 C12N15/70;C12N15/66;C07K14/705 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 梁健嘉;聂秋苗;唐巧燕;何新柳;刘丕琼;陈春裕 申请(专利权)人 南宁维尔凯生物科技有限公司
代理机构 广西南宁公平知识产权代理有限公司 代理人 南宁维尔凯生物科技有限公司
地址 530000 广西壮族自治区南宁市江南区国凯大道19号A栋319号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种人蛋白基因Notch3胞内片段克隆载体,在pcDNA3.1载体的KpnI和XbaI酶切位点之间构建有人蛋白基因Notch3胞内片段序列。据此,还建立了相应构建方法。实验结果显示,使用该测序验证后的过表达质粒转染的细胞经qPCR检测和蛋白质免疫印迹检测,均可在细胞中特异性高表达N3ICD的mRNA及蛋白,测定结果清晰准确,价格低廉,大幅缩减实验成本。因此,本发明构建的N3ICD过表达载体可以作为现成的亚克隆模板,参与到过表达载体构建和过表达慢病毒包装中,为心肌系统疾病的研究带来巨大便利。本发明有效解决了人源N3ICD片段克隆困难和在细胞系中高表达的问题,为Notch3基因通路研究提供了实验基础。