一种高产核酸片段的制备方法
基本信息
| 申请号 | CN202110396644.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112921030A | 公开（公告）日 | 2021-06-08 |
| 申请公布号 | CN112921030A | 申请公布日 | 2021-06-08 |
| 分类号 | C12N15/10;C12N15/63 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张永正;马诗敏;张征立;李洋;康涛 | 申请（专利权）人 | 江苏耀海生物制药有限公司 |
| 代理机构 | 深圳龙图腾专利代理有限公司 | 代理人 | 姜书新 |
| 地址 | 225300 江苏省泰州市医药高新区健康大道801号27幢（药城） | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明适用于生物技术领域，提供了一种高产核酸片段的制备方法，该制备方法包括以下步骤：在目标基因序列的5´和3´端分别引入同一个限制性内切酶的识别位点，以便经单一酶切获取目的基因片段，并保证片段的均一性；利用酶切、连接方式将目的基因片段与载体骨架连接成一种含有至少2Copy的目的基因片段的重组质粒。扩增并收集重组质粒，利用单一限制性内切酶酶切重组质粒，得到酶切液；将酶切液利用AKTA经阴离子交换树脂分离纯化，获得目的基因片段。该方法实现了单一批次目的基因片段的高产出，降低了发酵及纯化的规模和批次量，缩短了生产周期，提高了设备利用率，增加了经济效益。 |
