实时荧光定量PCR检测PD-L1基因表达量的方法、引物及试剂盒

基本信息

申请号 CN201811175288.0 申请日 -
公开(公告)号 CN111020029A 公开(公告)日 2020-04-17
申请公布号 CN111020029A 申请公布日 2020-04-17
分类号 C12Q1/6886;C12N15/11;C12Q1/6851 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 唐向荣;唐志君;张冀申 申请(专利权)人 上海康派尼恩医疗科技有限公司
代理机构 上海金盛协力知识产权代理有限公司 代理人 上海康派尼恩医疗科技有限公司
地址 201313 上海市浦东新区康新公路3399弄26号215室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种实时荧光定量PCR检测PD‑L1基因表达量的方法、引物及试剂盒,所述方法,包括如下步骤:(1)同步抽提样本中的DNA及mRNA;(2)以待测mRNA为模板,通过特殊的反转录引物合成第一链cDNA;(3)分别采用反转录引物上的特异序列所对应的引物及参照基因对应的特异性引物,以反转录产物cDNA及参照基因DNA为模板,进行双通道实时荧光定量PCR扩增,同时扩增目的基因cDNA与参照基因,并以参照基因和目的基因序列连接构建的质粒为标准品,根据各自的标准曲线,计算样本中目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的表达水平,本发明同步修正各种实验操作误差,保证了结果的可靠性和可重复性。