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白蛋白启动子驱动的白蛋白表达载体

基本信息

申请号	CN201811433912.2	申请日	-
公开（公告）号	CN109504709A	公开（公告）日	2019-03-22
申请公布号	CN109504709A	申请公布日	2019-03-22
分类号	C12N15/867（2006.01）I; C12N15/113（2010.01）I; C12N5/10（2006.01）I; C07K14/765（2006.01）I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	朱颂成; 倪华; 赵晓梅	申请（专利权）人	上海安民生物技术有限公司
代理机构	北京纪凯知识产权代理有限公司	代理人	陆惠中;王永伟
地址	201203 上海市浦东新区中国（上海）自由贸易试验区蔡伦路781号810室
法律状态	-

摘要

本发明公开了由人血白蛋白启动子驱动的用于在细胞中表达白蛋白基因的载体，并在细胞中成功高效表达外源白蛋白。该表达载体由骨架和装载于骨架上的表达框组成，该表达框由人血清白蛋白启动子及其第一个内含子、白蛋白基因、内核糖体进入位点序列(IRES)和标记基因组成。该载体中人血白蛋白启动子和IRES序列驱动白蛋白基因和标记基因同时表达。利用该载体在人细胞中成功高效表达重组人血清白蛋白，分泌到培养液中的白蛋白达到750mg/L，纯度超过90％。该载体为首例用人血白蛋白启动子驱动人血白蛋白基因表达的载体，也是首例用于人细胞或哺乳动物细胞表达白蛋白的载体。该载体还克服了目的基因与筛选标记分用不同启动子的载体系统中在筛选时的高假阳性率和表达不均衡的问题。