一种检测脱靶效应方法及其应用

基本信息

申请号 CN202011069812.3 申请日 -
公开(公告)号 CN112159838B 公开(公告)日 2022-07-01
申请公布号 CN112159838B 申请公布日 2022-07-01
分类号 C12Q1/6869(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 荣知立;林瑛;黄洪新;周家健 申请(专利权)人 南方医科大学
代理机构 北京市诚辉律师事务所 代理人 -
地址 510515广东省广州市白云区沙太南路1023号-1063号
法律状态 -

摘要

摘要 本申请公开了一种检测脱靶效应方法及其应用。所述方法涉及一套可以检测CRISPR‑Cas脱靶效应的建库流程,内容包括转染试剂的更换,ODN序列的优化,Adaptors的改进,Primers的改善和PCR方法的简化,以及所述方法在CRISPR/Cas基因编辑系统中的应用。一种检测CRISPR/Cas系统脱靶效应的方法,可以实现低门槛,高通量,适合更多普通实验室使用,其测序仪器不再限制于Miseq,可以是通量更大的Hiseq或Novaseq平台。CRISPR/Cas基因编辑系统脱靶效应检测方法可以实现各种CRISPR核酸酶(包括高保真等)的特异性检测。