适用于单细胞RRBS测序的文库建立方法及其应用
基本信息
申请号 | CN201710864035.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN107475779A | 公开(公告)日 | 2017-12-15 |
申请公布号 | CN107475779A | 申请公布日 | 2017-12-15 |
分类号 | C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I | 分类 | 组合技术〔8〕; |
发明人 | 李静;陈昌岳;王芳;张祥林;胡秋萍;董东;郑冠涛;段彪 | 申请(专利权)人 | 上海美吉医学检验有限公司 |
代理机构 | 上海光华专利事务所(普通合伙) | 代理人 | 上海美吉医学检验有限公司 |
地址 | 200120 上海市浦东新区康新公路3399号3号楼5层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及分子生物学技术领域,具体公开了一种适用于单细胞RRBS测序的文库建立方法及其应用。本发明公开的适用于单细胞RRBS测序的文库建立方法包括如下步骤:(1)对样本的基因组DNA依次进行酶切、末端补平和加A、加接头以及重亚硫酸盐转化;(2)对步骤(1)中转化后的基因组DNA进行线性扩增;(3)对步骤(2)中线性扩增的扩增子进行指数扩增,所述指数扩增的扩增子用作测序文库。该方法测序所需的DNA起始量低,可以对单个细胞的基因组进行甲基化测序;具有有效的文库片段控制步骤,通过线性扩增步骤控制最终产物的片段,避免繁复操作的同时提高覆盖率。 |
