用于凋亡细胞识别和标记的融合蛋白及其制备方法和应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

用于凋亡细胞识别和标记的融合蛋白及其制备方法和应用

基本信息

申请号	CN201810743895.6	申请日	-
公开（公告）号	CN110684115A	公开（公告）日	2020-01-14
申请公布号	CN110684115A	申请公布日	2020-01-14
分类号	C07K19/00;C12N15/65;C12N15/70	分类	有机化学〔2〕;
发明人	华子春;高梦月	申请（专利权）人	南京吉瑞康生物科技有限公司
代理机构	江苏银创律师事务所	代理人	南京吉瑞康生物科技有限公司
地址	210019 江苏省南京市建邺区嘉陵江东街18号03幢6层
法律状态	-

摘要

本发明涉及生物化学和检验与检测领域，具体涉及黄色荧光蛋白标记的Annexin A5及其制备方法和在制备凋亡检测试剂中的应用。本发明以pET28a‑Annexin A5‑EGFP‑his重组质粒为模板，构建了重组质粒pET28a‑Annexin A5‑Citrine‑his、pET28a‑Annexin A5‑Venus‑his、pET28a‑Annexin A5‑Ypet‑his。大量表达Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白，通过Ni柱亲和层析纯化获得了这三种蛋白，纯度约为90％。流式细胞仪检测结果显示：Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白均可以识别和标记凋亡细胞，它们与凋亡细胞的亲和力分别是3113nmol/L，444.3nmol/L和391.6nmol/L。以上结果显示Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白均可以用于凋亡细胞的识别和标记。