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一种高细胞毒活性的CIK细胞的制备方法

基本信息

申请号	CN201510837518.5	申请日	-
公开（公告）号	CN105274053B	公开（公告）日	2019-03-26
申请公布号	CN105274053B	申请公布日	2019-03-26
分类号	C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	熊桂荣	申请（专利权）人	北京大地同年生物科技有限公司
代理机构	北京中知法苑知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	李明
地址	100176 北京市大兴区北京经济技术开发区永昌北路3号1幢2层102室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种高细胞毒活性的CIK细胞的制备方法，包括如下步骤：(1)取患者外周血，收集外周血的单个核细胞部分；(2)将步骤(1)收集的外周血的单个核细胞部分离心，弃去上清液，获得单个核细胞；(3)取单个核细胞按照1×10⁶/mL细胞，加入含500～2000IU/mLγ干扰素和80～120ng/mLTurrapubinA的完全培养基，开始诱导培养；其中，完全培养基，包括含体积百分比为10％FBS的RPMI1640细胞培养液；(4)步骤(3)的细胞培养20～28小时后，加入50～1000ng/mL抗人CD3单克隆抗体和500～2000IU/mL重组人IL‑2，继续诱导培养，其中，每隔2～3天传代培养一次，整个诱导培养的时间为13～21天，获得CIK细胞。本发明提供的制备方法可以获得高纯度、高增殖力和高细胞毒活性的CIK细胞，可用于肿瘤的细胞免疫治疗。