高效检测融合蛋白/抗体Fc段不能介导ADCC和CDC活性的方法

基本信息

申请号 CN202110233928.4 申请日 -
公开(公告)号 CN112980851A 公开(公告)日 2021-06-18
申请公布号 CN112980851A 申请公布日 2021-06-18
分类号 C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 肖志华;伍小春 申请(专利权)人 上海奥浦迈生物科技股份有限公司
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 陆惠中;田欢
地址 201321 上海市浦东新区紫萍路908弄28号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于生物领域,具体涉及一种高效检测融合蛋白或者抗体Fc段不能介导产生ADCC和CDC活性的方法。首先公开了一种检测方法,所述检测方法能够快速找到能介导ADCC和CDC效应的阳性抗体和阳性细胞,且能够直接验证目标蛋白或者抗体的Fc序列不能或者只能微弱介导产生ADCC和CDC效应,所述方法包括:S1、载体的构建:根据Rituximab和IgG4的Fc序列进行密码子优化,合成目的基因并插入质粒中,构建瞬转表达载体;S2、质粒抽提和测序;S3、蛋白瞬时表达;S4、蛋白纯化;S5、ADCC和CDC活性分析。本发明公开的检测方法也能直接验证目标蛋白或者抗体的Fc段不能或者只能微弱介导产生ADCC和CDC效应;检测方法可靠、适用性广且高效。