一种石蜡包埋样本中蛋白质的提取及检测分析方法
基本信息
| 申请号 | CN201910804757.9 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110501437B | 公开（公告）日 | 2021-03-23 |
| 申请公布号 | CN110501437B | 申请公布日 | 2021-03-23 |
| 分类号 | G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I | 分类 | 测量；测试; |
| 发明人 | 陈亚运;华权高;李立;赵海义;鲁思琴;李如萍;舒芹;张雪娇 | 申请（专利权）人 | 武汉金开瑞生物工程有限公司 |
| 代理机构 | 武汉蓝宝石专利代理事务所（特殊普通合伙） | 代理人 | 严超 |
| 地址 | 430000湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发楼B1楼 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明具体涉及一种石蜡包埋样本中蛋白质的提取及检测分析方法。本发明采用丙酮沉淀法，充分裂解后的蛋白溶液加入冷丙酮和30mM DTT，涡旋混匀，‑20℃沉淀，离心时去掉上清后采用质谱更兼容的溶液重悬蛋白，SDS等表面活性剂能够和蛋白结合，丙酮沉淀蛋白时会一起沉淀下来，所以丙酮沉淀一次只能去掉部分的SDS，待重悬的蛋白进行还原烷基化后，再次加入冷丙酮和10mM DTT，‑20℃沉淀，离心去掉上清后再次采用质谱更兼容的溶液重悬蛋白，经过两次丙酮沉淀与裂解液重悬置换，SDS对后续实验的影响基本消除，并且每个样品只需3ml左右的丙酮，成本大约0.1元，相较于超滤管，节省了更多成本。 |
