一种目的基因片段的合成方法
基本信息
| 申请号 | CN202011210492.9 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112481285A | 公开（公告）日 | 2021-03-12 |
| 申请公布号 | CN112481285A | 申请公布日 | 2021-03-12 |
| 分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 陈羽西;曹志雄;颜中南;朱英宏 | 申请（专利权）人 | 武汉金开瑞生物工程有限公司 |
| 代理机构 | 北京众达德权知识产权代理有限公司 | 代理人 | 江慧 |
| 地址 | 430206湖北省武汉市东湖开发区高新大道818号高科医疗器械园B11号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种目的基因片段的合成方法，所述方法包括：获得目的基因片段的多条上游引物和多条下游引物；将所述多条上游引物、所述多条下游引物和双蒸水混匀，获得引物对溶液；将所述引物对溶液、PCR Buffer和ddH2O混匀，获得退火反应液；将所述退火反应液放置于温度为95～105℃的热水中，后自然冷却至室温，获得退火产物；将载体双酶切、后用T4 DNA聚合酶处理，获得第二粘性末端的线性载体；将所述退火产物和所述更长粘性末端的线性载体孵育，后转化进感受态细胞，获得带有目的基因片段的转化子。该方法合成效率高且正确率高，适合高度重复、高GC、发卡等特殊结构序列的目的基因片段的合成。 |
