一种丙氨酸脱氢酶突变体及其应用

基本信息

申请号 CN201810033877.9 申请日 -
公开(公告)号 CN107937361A 公开(公告)日 2018-04-20
申请公布号 CN107937361A 申请公布日 2018-04-20
分类号 C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 齐俊平;张帆;刘佳;刘立明 申请(专利权)人 金华利家园生物工程有限公司
代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 代理人 张勇
地址 321000 浙江省金华市婺城区金西南区D-09-04地块
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种丙氨酸脱氢酶突变体及其应用,属于生物工程技术领域。本发明通过蛋白质工程改造嗜热古细菌(Archaeoglobus fulgidus)来源丙氨酸脱氢酶,使其最适酶活温度由82℃降至50℃,在大肠杆菌K12中删除L‑丙氨酸合成竞争路径上的关键基因,减少副产物生产,重组菌株中的编码L‑丙氨酸脱氢酶alaD基因和丙氨酸消旋酶dadX基因替换为改造后的嗜热古细菌来源的丙氨酸脱氢酶基因,利用该重组菌株进行在发酵罐中进行两阶段发酵,发酵42h,L‑丙氨酸产量达到153.9g/L,糖酸转化率81.0%。