一种microRNA定量检测方法
基本信息
申请号 | CN201210153449.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN102676677B | 公开(公告)日 | 2013-04-10 |
申请公布号 | CN102676677B | 申请公布日 | 2013-04-10 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 李启靖 | 申请(专利权)人 | 天津旷博同生生物技术有限公司 |
代理机构 | - | 代理人 | - |
地址 | 100176 北京市大兴区亦庄经济技术开发区地盛东路1号爱普益大厦2幢3层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种microRNA定量检测方法,包括如下步骤:(1)提取样本的总RNA;(2)用polyA聚合酶处理总RNA,使miRNA的3’端加上一段polyA尾巴;(3)用5’端含有接头序列的oligo(dT)反转录引物进行反转录,使得到的第一链cDNA加上一段接头;(4)使用待测miRNA序列特异性正向引物和与所述接头序列互补的通用反向引物进行定量实时PCR扩增,其中,所述通用反向引物是长度不同的两种反向引物的混合物。本发明的方法可以对miRNA的表达进行定量检测和分析,大大提高了现有检测方法的特异性、灵敏性和重复性。 |
