一种以基因工程水稻表达和制备重组瑞替普酶的方法
基本信息
| 申请号 | CN202110735731.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113337493A | 公开（公告）日 | 2021-09-03 |
| 申请公布号 | CN113337493A | 申请公布日 | 2021-09-03 |
| 分类号 | C12N9/64（2006.01）I;C12N15/84（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 杨代常;余文卉 | 申请（专利权）人 | 武汉禾元生物科技股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 | 代理人 | 黄韧敏 |
| 地址 | 430000湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种经水稻密码子优化的重组瑞替普酶基因，相关载体及制备基因工程水稻种子的方法和重组瑞替普酶分离纯化方法。将基因工程稻谷加工粉碎后与提取缓冲液混合，提取过滤后得到含重组瑞替普酶的粗提取物；分离纯化步骤依次包括：1）将含重组瑞替普酶的粗提取物进行阳离子交换层析，得到初级产物I；2）将初级产物I进行疏水层析，得到中间产物II；3）将中间产物II进行苯甲脒亲和层析，得到纯化的重组瑞替普酶。该方法无需体外复性，安全性高，容易规模化，所获得的重组瑞替普酶达到98％以上的HPLC纯度。 |
