一种重组蛋白酶K工业化纯化及冻干方法
基本信息
| 申请号 | CN202010960308.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114181925A | 公开（公告）日 | 2022-03-15 |
| 申请公布号 | CN114181925A | 申请公布日 | 2022-03-15 |
| 分类号 | C12N9/58（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 占全;杨代常 | 申请（专利权）人 | 武汉禾元生物科技股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 | 代理人 | 黄韧敏;魏紫 |
| 地址 | 430000湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种重组蛋白酶K工业化纯化及冻干方法。将毕赤酵母表达的重组蛋白酶K发酵液澄清过滤后加入稀释液稀释，并经过超滤步骤进行浓缩和透析，获得含微量金属离子和色素的蛋白酶K透析液，将该透析液经过阳离子交换层析分离纯化，获得含重组蛋白酶K的洗脱液；将含重组蛋白酶K的洗脱液放在室温结晶沉淀4‑6h，搅拌混匀后倒入正压过滤装置中，压滤获得蛋白酶K滤饼；该滤饼复溶后，加入冻干赋形剂，按照优化的冻干工艺进行冻干，分包装后获得蛋白酶K成品。该方法工艺步骤简单、收率高、成本低，易于工业化放大生产。所获得的蛋白酶K目标物产量高、活性好。 |
