一种利用基因工程水稻表达人糜蛋白酶原和制备重组人糜蛋白酶的方法
基本信息
申请号 | CN202011156258.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN114480354A | 公开(公告)日 | 2022-05-13 |
申请公布号 | CN114480354A | 申请公布日 | 2022-05-13 |
分类号 | C12N9/76(2006.01)I;C12N15/57(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 杨代常;董亮亮;李坤鹏;尹恒 | 申请(专利权)人 | 武汉禾元生物科技股份有限公司 |
代理机构 | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 | 代理人 | - |
地址 | 430000湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种高效表达人糜蛋白酶原的基因工程水稻稻谷的制备方法及从表达人糜蛋白酶原的基因工程稻谷制备重组人糜蛋白酶的方法。将高效表达经水稻密码子优化的人糜蛋白酶原基因的基因工程稻谷加工粉碎后与提取缓冲液混合,提取过滤后得到含重组人糜蛋白酶原的粗提取物;将含重组人糜蛋白酶原的粗提取物经过阳离子交换层析和阴离子交换层析,获得重组人糜蛋白酶原纯化目标物。该重组人糜蛋白酶原用胰蛋白酶激活,冷冻干燥后获得重组人糜蛋白酶。该方法操作简单,无动物源性材料,获得的糜蛋白酶纯度和活性高,成本低,易于工业化放大。 |
