一种细胞悬浮培养生产重组人血小板生成素的方法

基本信息

申请号 CN201610247501.9 申请日 -
公开(公告)号 CN105838664B 公开(公告)日 2016-08-10
申请公布号 CN105838664B 申请公布日 2016-08-10
分类号 C12N5/071(2010.01)I 分类 -
发明人 张晖;张静;陈超 申请(专利权)人 深圳未名新鹏生物医药有限公司
代理机构 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 陈剑聪
地址 518000广东省深圳市南山区西丽街道高新北二道18号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提出了一种细胞悬浮培养生产重组人血小板生成素的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)驯化携带有编码人血小板生成素基因序列的CHO细胞株适应化学限定培养基,筛选获得高表达重组人血小板生成素的单克隆细胞株,并建立原始细胞库、主细胞库和工作细胞库;(2)工程细胞的悬浮培养,包括种子复苏、细胞扩增、细胞接种以及悬浮流加培养,然后收获上清液;悬浮流加培养包括添加物的优化、流加补料的筛选以及流加方法的优化。本发明培养出的细胞密度高、容易放大、生产周期短、表达量高,收获生产重组人血小板生成素发酵液。