一种自内裂解大肠杆菌的裂解酶及其应用
基本信息
| 申请号 | CN201510197003.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN104762285B | 公开（公告）日 | 2017-10-27 |
| 申请公布号 | CN104762285B | 申请公布日 | 2017-10-27 |
| 分类号 | C12N9/88(2006.01)I;C12N15/60(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 危宏平;杨航;余军平 | 申请（专利权）人 | 武汉乐斯吉生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 北京市隆安律师事务所 | 代理人 | 武汉菲吉乐科生物科技有限公司;菲吉乐科股份有限公司 |
| 地址 | 430075 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道858号生物医药园A7展示中心 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种自内裂解大肠杆菌的裂解酶及其应用。本发明采用基因拼接的手段，构建了一个全新的裂解酶ClyN，该酶在大肠杆菌中表达后能导致宿主大肠杆菌的自裂解，释放出胞内表达的ATP和蛋白质。重组蛋白ClyN表达质粒能很好的在大肠杆菌BL21(DE3)中复制，在IPTG的诱导下表达15 min后即可观察到明显的诱导大肠杆菌自裂解的现象，诱导裂解效率为99.8%。当宿主细菌中表达有异源增强型绿色荧光蛋白（EGFP）时，EGFP会在大肠杆菌裂解后释放到溶液中，且其释放效率是直接超声破碎效率的89%。因此，ClyN能用于异源蛋白在大肠杆菌中表达后的提取与释放，具有广大的应用前景。 |
