一种基于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的方法
基本信息
| 申请号 | CN201611202242.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN106755410A | 公开（公告）日 | 2017-05-31 |
| 申请公布号 | CN106755410A | 申请公布日 | 2017-05-31 |
| 分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 孙涛;刘潇 | 申请（专利权）人 | 杭州艾沐蒽生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 | 代理人 | 孙涛;杭州艾沐蒽生物科技有限公司 |
| 地址 | 610072 四川省成都市青羊区大庆路91号2栋1单元10号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明属于分子生物学检测领域，特别是涉及一种基于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的方法，包括获取人血液样本10mL于EDTA抗凝管、利用淋巴细胞分离液Ficoll‑1077进行外周血单核细胞（PBMC）的分离、利用Trizol的方法提取PBMC的总RNA，所用试剂为RNAzol RT、RNA反转录成cDNA，并同时在cDNA 5’端添加接头、PCR1、PCR2和纯化和进行高通量测序等步骤。通过从接头的上游引物到C区的下游引物，获得淋巴细胞中TCR （Alpha链或Beta链）和BCR（Heavy链或Light链）的基因序列的全长信息。 |
