用于qPCR精确定量Illumina平台二代测序样本的定量标准品及其复制方法
基本信息
| 申请号 | CN201711343444.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108103174A | 公开（公告）日 | 2018-06-01 |
| 申请公布号 | CN108103174A | 申请公布日 | 2018-06-01 |
| 分类号 | C12Q1/6869;C12Q1/686;C12Q1/6806 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 李同恩;罗玺;师鸿翔;周茜;陈田甜;方亚慧;刘春柳;郑康;张振宇;赵鹏;王秉孝;朱兵 | 申请（专利权）人 | 北京中源维康基因科技有限公司 |
| 代理机构 | 天津才智专利商标代理有限公司 | 代理人 | 中源协和基因科技有限公司;北京中源维康基因科技有限公司 |
| 地址 | 300304 天津市东丽区空港经济区东九道45号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种用于qPCR精确定量Illumina平台二代测序样本的定量标准品及其复制方法，包括以下步骤：(1)以商品化试剂盒中的标准品为模板，利用P1、P2接头引物，进行PCR扩增，接头引物P1、P2的核苷酸序列为：P1：5"‑AATGATACGGCGACCACCGAGA‑3"P2：5"‑CAAGCAGAAGACGGCATACGAG‑3"；(2)反应完成后用AMPure XP bead纯化，纯化完成后，进行Qubit定量，Qubit测定浓度后，10倍逐级初步稀释，稀释后的样品进行定量实验，挑选出与商品化标准品浓度最为接近的样品，作为复制的标准品1，复制的标准品得到后，用无酶水进行10倍逐级稀释，得到复制的标准品第2‑6个；(3)复制的标准品保存于包含缓冲体系和稳定剂的溶液中，本发明的定量准确，使用方便，相对于商品化试剂盒，大大降低了实验的成本。 |
