hTERT基因作为内参基因在利用qPCR直接检测血浆中cfDNA含量中的用途专利查询专利号|摘要-满商公司网

hTERT基因作为内参基因在利用qPCR直接检测血浆中cfDNA含量中的用途

基本信息

申请号	CN201711334588.4	申请日	-
公开（公告）号	CN107974505A	公开（公告）日	2018-05-01
申请公布号	CN107974505A	申请公布日	2018-05-01
分类号	C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12Q1/6848	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	李同恩;罗玺;师鸿翔;郑康;朱明宇;周茜;刘春柳;赵圆圆;张文会;王红飞;刘媛;张振宇;赵鹏;王秉孝;朱兵	申请（专利权）人	北京中源维康基因科技有限公司
代理机构	天津才智专利商标代理有限公司	代理人	中源协和基因科技有限公司;北京中源维康基因科技有限公司
地址	300304 天津市东丽区空港经济区东九道45号
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种hTERT基因作为内参基因在利用qPCR直接检测血浆中cfDNA含量中的用途，本发明通过检测DNA中看家基因或稳定出现的某些非编码重复序列，达到cfDNA定量的目的。进行qPCR之前，血浆用备好的缓冲液和蛋白酶K处理，以去掉蛋白质，在反应混合物中加入一种用于困难模板扩增的特殊聚合酶(velocity polymerase)，该酶每10S可延伸l kb碱基，血浆1：40稀释后，不需其他处理，直接加入反应体系进行qPCR测定血浆cfDNA浓度，通过扩增两种长度的靶序列对cfDNA定量。本发明可以有效的去除掉由于PCR及测序引入的错误突变，降低检测的背景噪音。对于0.1％的检测限，其灵敏度可以达到90％以上，特异度高达99.9％。