一种微量DNA的定量方法

基本信息

申请号 CN201911082549.9 申请日 -
公开(公告)号 CN110791554A 公开(公告)日 2020-02-14
申请公布号 CN110791554A 申请公布日 2020-02-14
分类号 C12Q1/6851 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 唐嘉婕;李文涛;徐辉;杨敬敏 申请(专利权)人 上海韦翰斯生物医药科技有限公司
代理机构 上海光华专利事务所(普通合伙) 代理人 上海韦翰斯生物医药科技有限公司
地址 201318 上海市浦东新区康新公路3399弄25号534室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供一种微量DNA的定量方法,至少包括以下步骤:设计内标模板;设计能够同时扩增目标模板和内标模板的引物对;利用所述引物对,将待测DNA序列和内标模板混合后进行PCR扩增;将扩增产物用二代测序平台对应的接头引物对进行再次扩增,获得二代测序文库;对所述二代测序文库进行二代测序平台测序;根据公式待测DNA的拷贝数=C*A1/A2,计算得目标模板的拷贝数,即为待测DNA的拷贝数;其中,C为内标模板的拷贝数;A1为目标模板序列的测序覆盖深度;A2为内标模板序列的测序覆盖深度。本发明不仅可以准确定量微量DNA,还可以直接读取目标DNA模板的序列,定量结果准确性不受非特异性扩增的影响。