酶法生产烟酰胺单核苷酸的方法和用于该方法的转化体
基本信息
| 申请号 | CN202110290561.X | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113005162A | 公开（公告）日 | 2021-06-22 |
| 申请公布号 | CN113005162A | 申请公布日 | 2021-06-22 |
| 分类号 | C12P19/30;C12N15/70;C12N15/66;C12N15/54;C12N15/56;C12N9/10;C12N9/24;C12N9/12 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 李倩;李晚军;唐德强;刘鹏 | 申请（专利权）人 | 绵阳晟氏健康科技有限公司 |
| 代理机构 | 成都行之专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 唐邦英 |
| 地址 | 621000 四川省绵阳市北川羌族自治县永昌镇蒋家河路33号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种酶法生产烟酰胺单核苷酸的方法和用于该方法的转化体，一种酶法生产烟酰胺单核苷酸的方法，包括以下步骤：S1、分别构建重组表达载体pET15b‑nadV、重组表达载体pET28a（+）‑Amn和重组表达载体pET28a（+）‑Prs，转化到大肠杆菌中，获得重组工程菌nadV、重组工程菌Amn和重组工程菌Prs；S2、分别发酵表达重组工程菌nadV、重组工程菌Amn和重组工程菌Prs，获得湿菌体；S3、分别对三种湿菌体进行破碎处理，获得三种粗酶液；S4、将三种粗酶液与烟酰胺、ATP、AMP、MgCl2、KCl和Tris‑HCl缓冲液混合，搅拌均匀后进行反应，控制反应温度为30‑50℃，维持pH值为6.5‑8.5，反应2‑8小时获得烟酰胺单核苷酸粗产品。本发明不使用价格较高且来源受限的底物作为起始原料，价格低廉、绿色环保，适宜大规模工业化生产。 |
