一种在MDCK全悬浮细胞上增殖禽流感病毒的方法及其应用

基本信息

申请号 CN201810551857.0 申请日 -
公开(公告)号 CN108753737A 公开(公告)日 2018-11-06
申请公布号 CN108753737A 申请公布日 2018-11-06
分类号 C12N7/00;C12N5/071;C12N5/02 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陈宏;王博;赵博;崔凯;黄琳;沈玥;李莉;杜鑫;张丽娜;金燕斌;朱长动 申请(专利权)人 吉林冠界生物技术有限公司
代理机构 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 吉林冠界生物技术有限公司
地址 134000 吉林省通化市梅河口市曙光镇罗家村
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种在MDCK全悬浮细胞上增殖禽流感病毒的方法及其应用。所述方法包括:将MDCK细胞全悬浮培养至7.0×106~1.0×107cells/mL时,按MOI=0.001~0.0001接种鸡胚禽流感病毒;接毒后在pH值6.9~7.3、溶氧30~60%、温度32~37℃的环境下培养,当病毒达到足够高的滴度后分离并提纯病毒粒子。本方法由于种毒无需循环,因而缩短了生产周期,且种毒变异风险大大降低。通过本发明提供的方法培养重组禽流感病毒的HA能够达到1:1024,每1ml病毒含量≥108.0TCID50,每0.1ml病毒含量≥108.0TCID50,而种毒的接入量量减少10倍以上。