一种用质粒转化细菌的方法

基本信息

申请号 CN201910592746.9 申请日 -
公开(公告)号 CN111718961B 公开(公告)日 2022-02-08
申请公布号 CN111718961B 申请公布日 2022-02-08
分类号 C12N15/87(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王洪琦;林继伟 申请(专利权)人 华大青兰生物科技(无锡)有限公司
代理机构 北京华睿卓成知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 唐莉
地址 214200江苏省无锡市宜兴市新街街道兴业路298号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种用质粒转化细菌的方法,该方法能够提高细菌转化效率。该方法是利用不同形态的质粒在温度变化时的不同表现来达到去除非目标质粒的目的,从而提高目标质粒的比率。在细菌转化时,转化用的环状质粒有两种形态,一种是开环质粒,一种是闭环质粒。在高温变性处理后,开环质粒的两条链会彻底分离成两条单链,而在随后的快速复性时无法有效恢复,而闭环质粒的两条链虽然也会分开,但会在随后的复性过程中快速恢复,而单链的质粒无法有效转化细菌。如果目标质粒是闭环质粒,那么高温变性处理可以有效提高闭环质粒在转化体系中的比例,从而降低随后筛选克隆的工作量。