单分子探针多重靶向捕获文库的构建方法及应用
基本信息
| 申请号 | CN202010983954.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112063690A | 公开（公告）日 | 2020-12-11 |
| 申请公布号 | CN112063690A | 申请公布日 | 2020-12-11 |
| 分类号 | C12Q1/6806(2018.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 段小红;张腾龙;杨春燕;杨文娟;李旋;王东亮;周启明 | 申请（专利权）人 | 北京求臻医学检验实验室有限公司 |
| 代理机构 | 重庆百润洪知识产权代理有限公司 | 代理人 | 北京求臻医学检验实验室有限公司 |
| 地址 | 100000北京市经济技术开发区经海四路156号院3号楼3层301 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及分子检测的技术领域，特别涉及单分子探针多重靶向捕获文库的构建方法及应用；包括以下步骤：根据靶目标区域序列设计并合成分子倒置探针；针对捕获的目标区域，靶序列互补区域探针A和靶序列互补区域探针B可特异性与目标区域模板互补结合，形成含有一个核苷酸至几百个核苷酸缺口的环状结构；然后加入4种游离的核苷酸，在DNA聚合酶的作用下以靶目标序列为模板填补缺口，DNA连接酶催化探针区域两端的3’，5’‑磷酸二酯键，形成完整的环化探针；用PCR扩增直接产生靶向区域的测序文库，此时的PCR扩增产物即为测序文库。本发明在传统的MIP技术基础上做了优化和改进，用于肿瘤相关的低频变异和甲基化的检测。 |
