生产草酸氧化酶的大肠杆菌表达系统、草酸氧化酶的生产方法及其应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

生产草酸氧化酶的大肠杆菌表达系统、草酸氧化酶的生产方法及其应用

基本信息

申请号	CN201810864547.4	申请日	-
公开（公告）号	CN109022471B	公开（公告）日	2021-07-20
申请公布号	CN109022471B	申请公布日	2021-07-20
分类号	C12N15/70;C12N9/02;C12Q1/26;A61K38/44;A61P19/06;A61P13/12;A61P13/04;C02F3/34;A23L29/00;C02F101/34;C02F103/28	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	汪小锋;吴玉峰;汪卫;刘艳红;陈火晴	申请（专利权）人	武汉康复得生物科技股份有限公司
代理机构	南京纵横知识产权代理有限公司	代理人	徐瑛;祝蓉蓉
地址	430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药加速器3.1期4幢3层（1）厂房
法律状态	-

摘要

本发明公开了生产草酸氧化酶的大肠杆菌表达系统、草酸氧化酶的生产方法及其应用。所述大肠杆菌表达系统中的重组表达质粒包含：草酸氧化酶基因、分子伴侣基因和促进锰离子泵入大肠杆菌细胞相关蛋白的基因。本发明通过对不同的锰离子相关蛋白的基因及其拷贝数，控制分子伴侣表达的启动子种类，以及草酸氧化酶的生产过程所用的培养基种类进行筛选和测试，获得草酸氧化酶的优化表达组合，使得草酸氧化酶在大肠杆菌中的表达活力超过80U/mL。细胞破碎液上清初步纯化的草酸氧化酶的比活力大于20U/mg，单体分子量大小在25kDa左右。本发明技术方案具有生产和纯化工艺简单，表达量和比活力高，易于工业放大，成本低，有利于这类酶的工业化生产和应用等优势。