荧光探针检测尿嘧啶-DNA糖基化酶活性的方法

基本信息

申请号 CN202011635433.6 申请日 -
公开(公告)号 CN112760363A 公开(公告)日 2021-05-07
申请公布号 CN112760363A 申请公布日 2021-05-07
分类号 C12Q1/686(2018.01)I 分类 -
发明人 乌拉迪斯拉夫 申请(专利权)人 诸暨加向生物科技有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 311800浙江省绍兴市诸暨市陶朱街道艮塔西路138号新金融大厦612
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种荧光探针检测尿嘧啶‑DNA糖基化酶活性的方法为在实时聚合酶链式反应仪中混合聚合酶链式反应缓冲液、一个基于荧光共振能量转移的荧光DNA探针、尿嘧啶‑DNA‑糖基化酶,将反应液在25℃‑37℃培养30分钟,而后在95℃加热2分钟,最后在25℃‑37℃培养10分钟,在聚合酶链式反应仪的荧光测量通道为波长520 nm处收集嘧啶‑DNA糖基化酶活性数据;所述的基于荧光共振能量转移的荧光DNA探针为FAM‑GCCAACCdUGGCTCT‑BHQ1,其中,FAM为荧光报告基团,BHQ1为荧光淬灭基团;所述的聚合酶链式反应缓冲液成份为Tris‑HCl、KCl、MgCl2。具有简单高效的技术优点。