适用于PacBio平台的全长扩增子快速建库方法、引物及测序方法
基本信息
申请号 | CN202010274612.5 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111455023A | 公开(公告)日 | 2020-07-28 |
申请公布号 | CN111455023A | 申请公布日 | 2020-07-28 |
分类号 | C12Q1/6806(2018.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 方涛 | 申请(专利权)人 | 武汉菲沙基因信息有限公司 |
代理机构 | 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人 | 武汉菲沙基因信息有限公司 |
地址 | 430000湖北省武汉市东湖高新技术开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发楼B1栋 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种适用于PacBio平台的全长扩增子快速建库方法、引物及基于该建库方法的全长扩增子测序方法。本发明针对全长扩增子测序需要进行PCR的特性,结合PacBio测序平台的哑铃型文库接头结构,设计了具有通用结合序列的扩增子引物、具有与通用结合序列匹配的哑铃型引物,并基于这两种特殊结构的引物提出一种适用于PacBio平台的全长扩增子快速建库方法,通过该方法建库,仅需在进行常规扩增后增加2个循环的环形引物扩增,即可实现测序接头的添加,同时,通过损伤修复酶的作用,使PCR产物成为适用于PacBio测序平台的标准文库。该方法将原有的PacBio标准建库流程优化为仅需一步扩增与修复,极大的简化了全长扩增子的文库构建流程,显著降低了测序成本。 |
