适用于PacBio平台的全长扩增子快速建库方法、引物及测序方法

基本信息

申请号 CN202010274612.5 申请日 -
公开(公告)号 CN111455023A 公开(公告)日 2020-07-28
申请公布号 CN111455023A 申请公布日 2020-07-28
分类号 C12Q1/6806(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 方涛 申请(专利权)人 武汉菲沙基因信息有限公司
代理机构 上海精晟知识产权代理有限公司 代理人 武汉菲沙基因信息有限公司
地址 430000湖北省武汉市东湖高新技术开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发楼B1栋
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种适用于PacBio平台的全长扩增子快速建库方法、引物及基于该建库方法的全长扩增子测序方法。本发明针对全长扩增子测序需要进行PCR的特性,结合PacBio测序平台的哑铃型文库接头结构,设计了具有通用结合序列的扩增子引物、具有与通用结合序列匹配的哑铃型引物,并基于这两种特殊结构的引物提出一种适用于PacBio平台的全长扩增子快速建库方法,通过该方法建库,仅需在进行常规扩增后增加2个循环的环形引物扩增,即可实现测序接头的添加,同时,通过损伤修复酶的作用,使PCR产物成为适用于PacBio测序平台的标准文库。该方法将原有的PacBio标准建库流程优化为仅需一步扩增与修复,极大的简化了全长扩增子的文库构建流程,显著降低了测序成本。