一种提高重组人脑利钠肽融合蛋白表达量的发酵工艺

基本信息

申请号 CN201710479162.1 申请日 -
公开(公告)号 CN107177649B 公开(公告)日 2020-03-20
申请公布号 CN107177649B 申请公布日 2020-03-20
分类号 C12P21/02 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 张艳;任东升;刘希望 申请(专利权)人 西藏诺迪康药业股份有限公司
代理机构 成都坤伦厚朴专利代理事务所(普通合伙) 代理人 西藏诺迪康药业股份有限公司
地址 850000 西藏自治区拉萨市北京中路93号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种提高重组人脑利钠肽融合蛋白表达量的发酵工艺,包括以下步骤:在发酵罐中,加入BHD培养基18~20L和甘油65~80mL,以及氨苄青霉素至其终浓度为100mg/L,接种,调节通气量使发酵液中的溶氧量为30%~50%,调节pH值为6.8~7.2,培养温度为37℃;当OD600为10~15时,加入异丙基硫代半乳糖苷至其终浓度为0.5~1.0mmol/L诱导,并向发酵罐内流加150~300mL/h的补料液A,3~6h后停止发酵培养,收获细菌,即可。本发明发酵工艺,显著提高了rhBNP融合蛋白的表达水平,其表达量高达34.5%~38.3%,具有良好的商业开发价值并取得了商业上的极大成功。