一种人皮肤组织来源成纤维细胞快速分离培养方法
基本信息
申请号 | CN201711281938.5 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN107779429A | 公开(公告)日 | 2018-03-09 |
申请公布号 | CN107779429A | 申请公布日 | 2018-03-09 |
分类号 | C12N5/077 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 戴博;聂苏秦;郭康合;何婷婷;王波;董凤娇 | 申请(专利权)人 | 陕西九州生物医药科技集团有限公司 |
代理机构 | 西安创知专利事务所 | 代理人 | 谭文琰 |
地址 | 710065 陕西省西安市高新技术产业开发区科技六路196号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种人皮肤组织来源成纤维细胞快速分离培养方法,该方法将成人或儿童术后遗弃的新鲜包皮组织清洗剪切后,依次采用分散酶II溶液和胶原酶IV溶液在37℃,水浴震荡的条件下消化,再经离心收集皮肤组织块,用培养基重悬,在37℃,CO2体积浓度为5%的培养箱中进行培养。本发明将分散酶II和胶原酶IV消化作用的温度由4℃提高到37℃,两种酶的活性均得到提高,通过水浴震荡使两种酶与对应底物的接触面积增大,有利于酶促反应的进行,从而大大缩短了两种酶消化的时间,提高了成纤维细胞分离培养的速度;同时降低了酶对组织细胞的损伤,提高了细胞的贴壁率,得到的原代成纤维细胞培养6~8天即进行传代。 |
