一种重组蛋白表达用工程菌株的构建方法
基本信息
| 申请号 | CN202011156995.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112375774A | 公开（公告）日 | 2021-02-19 |
| 申请公布号 | CN112375774A | 申请公布日 | 2021-02-19 |
| 分类号 | C12N15/70(2006.01)I; | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 陈龙飞;应跃斌;祝静静;宫丽颖;巩尊洋;梁学军 | 申请（专利权）人 | 浙江新码生物医药有限公司 |
| 代理机构 | 北京沁优知识产权代理有限公司 | 代理人 | 郭峰 |
| 地址 | 312000浙江省绍兴市滨海新城畅和路58号环保中心辅助楼2楼 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种重组蛋白表达用工程菌株的构建方法，包括如下步骤，选择大肠杆菌基因组上的硫氧还原蛋白和谷胱甘肽还原酶编码基因(trxB和gor)为靶标，利用CRISPR技术定点敲入含非天然氨基酸技术元件的同源重组片段，实现在无筛选标记下的基因插入，得到重组蛋白表达用工程菌株，通过上述设置，本发明得到的菌株具备在重组蛋白表达时定点插入非天然氨基酸的能力，且消除了质粒不稳定的问题，因此无需向发酵培养基中添加抗生素，在药物的工业化发酵生产中可应用。 |
