一种对化学修饰后磁性固定化PLA1再活化的方法

基本信息

申请号 CN201911002105.X 申请日 -
公开(公告)号 CN110643595A 公开(公告)日 2020-01-03
申请公布号 CN110643595A 申请公布日 2020-01-03
分类号 C12N11/14;C12N9/18;C12N9/96 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 史永革;张理博;唐洪琳;罗淑年;李运美;李仁彬;况楠;于殿宇 申请(专利权)人 黑龙江精益检测有限公司
代理机构 哈尔滨龙科专利代理有限公司 代理人 李长春
地址 150030 黑龙江省哈尔滨市开发区哈平路集中区哈平东路1号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明利用Fe3O4纳米粒子和SiOx复合,得到磁性固定化磷脂酶A1,再用葡聚糖‑醛‑甘氨酸对磁性固定化酶化学修饰,得到Fe3O4/SiOx‑g‑P(GMA)‑PLA1‑Dx‑Gly,通过固定化和化学修饰后的磷脂酶A1的稳定性增加。以修饰后的磷脂酶A1为研究对象,将其应用在大豆油脱胶体系中,修饰后的磁性固定化磷脂酶A1重复使用6次后,相对酶活仍80%,提高了磷脂酶A1的重复使用次数。分离取出,在盐酸胍溶液中温育,处理后的磁性固定化酶悬浮于Tris‑HCl缓冲溶液中,以相对酶活作为评价指标,得出磁性固定化PLA1再活化的最佳条件为溶液pH为7,活化温度为25℃,活化时间为20 h,效应物浓度为0.20 mol/L,此时磁性固定化PLA1的酶活最高,回收酶活为初始酶活的99%,提高了磷脂酶A1的利用率,为工业化生产带来巨大的经济效益。