基于蛋白反式剪接的纳米固定化方法、应用及固定化酶
基本信息
| 申请号 | CN202210362600.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114686467A | 公开（公告）日 | 2022-07-01 |
| 申请公布号 | CN114686467A | 申请公布日 | 2022-07-01 |
| 分类号 | C12N11/02（2006.01）I;C12N9/16（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张桂敏;周晨;卢争辉;向腊;巫攀 | 申请（专利权）人 | 湖北大学 |
| 代理机构 | 北京轻创知识产权代理有限公司 | 代理人 | - |
| 地址 | 430062湖北省武汉市武昌区友谊大道368号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及基于蛋白反式剪接的纳米固定化方法、应用及固定化酶。该方法将基底蛋白的核苷酸序列和目标蛋白的核苷酸序列与断裂型内含肽两端的核苷酸序列分别连接，连接后分别进行融合表达；将融合表达后的基底蛋白制备成酶杂化纳米花，使基底蛋白被固定化；将固定化后的基底蛋白与融合表达后的目标蛋白混合，通过断裂型内含肽的反式自剪接功能直接进行特异性自组装，使目标蛋白被间接固定化。该方法将断裂型内含肽和酶杂化纳米花相结合，可将目标蛋白的纯酶或者粗酶液直接与固定化的基底蛋白结合，避免对蛋白构象的影响，高效便捷。该方法制备玉米赤霉烯酮降解的固定化酶，具有良好稳定性、催化效率和重复利用率。 |
