一种用于生产重组人IL-1ra的工程菌株及制备方法和应用

基本信息

申请号 CN202111110017.9 申请日 -
公开(公告)号 CN113957026A 公开(公告)日 2022-01-21
申请公布号 CN113957026A 申请公布日 2022-01-21
分类号 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C07K14/47(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王苗颖;莫晓宁;马大龙;范中玉;李强;卢键;赵建权;雷苑;李冬梅;卢文娜 申请(专利权)人 北京君泰联合科技有限公司
代理机构 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 代理人 张红艳
地址 100023北京市大兴区北京经济技术开发区科创六街88号院6号楼3单元306室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及基因工程技术领域,尤其是一种用于生产重组人IL‑1ra的工程菌株及制备方法和应用,该工程菌株的制备方法包括以下步骤:1)载体的选择及改造:选用大肠杆菌载体pKpL‑3a进行改造;2)构建rhIL‑1ra表达质粒:将rhIL‑1ra的基因序列连接到步骤(1)获得的构建好的空载体上;用DNA连接酶进行连接;连接产物直接转入感受态细胞,构建工程菌株;3)构建工程菌株及表达。采用本发明方法构建的工程菌株表达量达到20‑40%以上,且无支原体、衣原体感染,不使用青霉素或大环内酯类抗生素,不使用IPTG作为诱导剂,符合药品生产的要求,符合大规模、工业化生产蛋白的需求。