耐高温SOD蛋白及其克隆和纯化方法
基本信息
申请号 | CN201610686560.6 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN106318940A | 公开(公告)日 | 2017-01-11 |
申请公布号 | CN106318940A | 申请公布日 | 2017-01-11 |
分类号 | C12N15/11(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 王学庆 | 申请(专利权)人 | 河南佰柯生物科技有限公司 |
代理机构 | 郑州德勤知识产权代理有限公司 | 代理人 | 黄军委 |
地址 | 450001 河南省郑州市高新区大学科技园区院内研发五号楼A座403、B座409室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明提供一种采用基因工程改造的耐高温SOD蛋白及其克隆和纯化方法,该耐高温SOD蛋白的氨基酸基序列为SEQ ID NO.1。其克隆和纯化方法包括:首先构建含有该基因的重组表达载体;然后将构建的重组表达载体导入宿主细胞,经诱导使该基因得到克隆;最后采用加热‑离心‑层析柱纯化的纯化方法使其得到纯化。本发明的表达产物具有突出的耐热性、酶活性可达到2500 u/mg~3000 u/mg、易纯化、稳定性好。本发明纯化后蛋白纯度可达到95%以上,且通过溶菌酶的作用及加热处理,使得细胞得到裂解和大部分宿主菌中非目的蛋白得到去除。该纯化步骤方法简单,可应用于大规模生产,节约成本。 |
