一种用于扩增重组犬腺病毒CAV2的稳定细胞系MDCK及其构建方法
基本信息
| 申请号 | CN201810095598.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108342362A | 公开（公告）日 | 2018-07-31 |
| 申请公布号 | CN108342362A | 申请公布日 | 2018-07-31 |
| 分类号 | C12N5/10;C12N15/867;C12N7/00;C12N15/65;C12R1/91 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 潘杏;李良凤;高娟;杨甜;黄晓苹 | 申请（专利权）人 | 武汉枢密脑科学技术有限公司 |
| 代理机构 | 武汉东喻专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 纪元 |
| 地址 | 430000 湖北省武汉市东湖高新技术开发区光谷七路128号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种表达犬腺病毒E1A基因和E1B基因的稳定细胞系、其构建方法和应用，通过将E1区的两个基因E1A和E1B分别构建到慢病毒载体中，然后让MDCK细胞分别稳定的表达E1A和E1B基因，构建了MDCK‑E1A‑E1B的稳定细胞系。本发明将片段较长不易构建的E1基因拆成了两段片段较短易于构建的E1A和E1B基因，提高了构建稳定细胞的成功率；E1A和E1B基因分别带有不同颜色的荧光蛋白，便于实时监控稳定细胞的稳定性。实验证明MDCK‑E1A‑E1B稳定细胞系比MDCK‑E1稳定细胞系扩增犬腺病毒滴度更高，为犬腺病毒在病毒活载体疫苗、基因治疗、癌症治疗等领域的应用上奠定了很好的基础。 |
