一种利用质粒辅助进行rAAV感染滴度检测的方法及试剂盒
基本信息
| 申请号 | 2020111966730 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112280801A | 公开（公告）日 | 2021-01-29 |
| 申请公布号 | CN112280801A | 申请公布日 | 2021-01-29 |
| 分类号 | C12N15/85(2006.01)I; | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 潘杏;何晓斌;刘光猛;张胜;贾宁;王梦蝶 | 申请（专利权）人 | 武汉枢密脑科学技术有限公司 |
| 代理机构 | 武汉华之喻知识产权代理有限公司 | 代理人 | 彭翠;曹葆青 |
| 地址 | 430223湖北省武汉市东湖高新技术开发区光谷七路128号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明属于生物学领域，更具体地，涉及一种利用质粒辅助进行rAAV感染滴度检测的方法及试剂盒。其通过对携带有E1a基因和E1b基因的HEK细胞瞬时转染包含编码AAV病毒Cap、Rep蛋白的基因质粒以及腺病毒辅助质粒的外源质粒，以该待测rAAV作为种子病毒，在转染外源质粒的HEK细胞中实现rAAV的复制和增殖；通过检测报告基因的表达或检测该细胞中复制和增殖产生的的rAAV基因组拷贝数，计算待测rAAV的感染滴度，不需引入辅助病毒，通过质粒辅助即可高效简单实现rAAV感染滴度的检测，由此解决现有技术rAAV感染滴度检测方法需要引入辅助病毒存在安全风险，且需要配合包装特定细胞系操作复杂等技术问题。 |
