测定生物样本中特异位点DNA甲基化水平的方法及其应用

基本信息

申请号 CN201810665835.7 申请日 -
公开(公告)号 CN110643702A 公开(公告)日 2020-01-03
申请公布号 CN110643702A 申请公布日 2020-01-03
分类号 C12Q1/6886(2018.01); C12Q1/6883(2018.01) 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 胡立夫; 陈琦; 梁昊原; 谷东风; 周晓莹 申请(专利权)人 深圳市圣必智科技开发有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 518057 广东省深圳市南山区科技园南区高新南七道数字技术园B1栋3楼A区2-2号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开一种测定生物样本中特异位点DNA甲基化水平的方法及其应用。该方法包括步骤:获取生物样本,并提取生物样本中的待测DNA片段;修饰待测DNA片段,将待测DNA片段中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶;以修饰后的DNA片段为模板DNA片段,以第一引物和第二引物分别从模板DNA片段两侧对模板DNA片段进行PCR扩增;处理经过PCR扩增后的PCR产物,去除多余的第一引物、第二引物和dNTPs,并纯化回收;检测待测DNA片段CpG位点的甲基化和去甲基化荧光偏振值;根据待测DNA片段CpG位点的甲基化和去甲基化荧光偏振值计算待测DNA片段的甲基化水平。实施本发明,具有简便、快捷、高通量、低成本、无需分离纯化等优点,适合大量检测临床珍贵的低浓度DNA样本的甲基化。