一种去除百日咳组分菌毛蛋白2/3内毒素的方法

基本信息

申请号 CN201910757403.3 申请日 -
公开(公告)号 CN110358802B 公开(公告)日 2021-06-18
申请公布号 CN110358802B 申请公布日 2021-06-18
分类号 C12P21/02;C07K14/23;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16;C12R1/01 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王长永;王梦舒;徐艳艳;梁洪野;闫慧;原秀娟 申请(专利权)人 长春百克生物科技股份公司
代理机构 北京集佳知识产权代理有限公司 代理人 刘猛
地址 130000 吉林省长春市高新开发区火炬路1260号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及生物制药技术领域,公开了一种去除百日咳组分菌毛蛋白2/3内毒素的方法。本方法将百日咳杆菌发酵培养后,离心收集菌体,菌体用尿素磷酸盐缓冲液抽提;离心收集上清,使用PEG‑8000和硫酸铵分别进行沉淀;沉淀使用磷酸盐缓冲液抽提,然后离心收集上清液,采用Q‑Sepharose层析柱处理,使用含氯化钠的磷酸盐缓冲液洗脱出Fim2/3组分。本发明联合PEG8000沉淀、硫酸铵沉淀和Q‑Sepharose层析柱处理三个操作,通过多重手段去除菌毛蛋白Fim2/3中的内毒素,可以在不带入外源物质的前提下,保持有效成分Fim2/3生物活性和回收率,同时将Fim2/3中的内毒素去除至10EU/mg以下。