一种高效表达猪瘟E2-IL1融合蛋白的重组CHO细胞株及其构建方法和应用
基本信息
申请号 | CN202010215284.1 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111304173A | 公开(公告)日 | 2020-06-19 |
申请公布号 | CN111304173A | 申请公布日 | 2020-06-19 |
分类号 | C12N5/10(2006.01)I | 分类 | - |
发明人 | 周佳彬;刘喜凤;刘燕;杨闯;曹玉飞;郑杰;马宁宁 | 申请(专利权)人 | 浙江鼎持生物制品有限公司 |
代理机构 | 北京金宏来专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人 | 浙江鼎持生物制品有限公司;北京鼎持生物技术有限公司 |
地址 | 311800浙江省绍兴市诸暨市陶朱街道环城北路368号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种高效表达猪瘟E2‑IL1融合蛋白的重组CHO细胞株及其构建方法和应用。该重组CHO细胞株经载有人工合成的E2‑IL1基因序列的载体转染,通过单克隆细胞筛选,获得表达E2‑IL1融合蛋白的重组细胞株;扩大培养至6孔板阶段即可实现无血清悬浮培养,缩短了培养时间,提高了表达量;用该E2‑IL1融合蛋白与佐剂ISA 206 VG制成疫苗免疫仔猪能够同时诱导体液免疫和细胞免疫,血清学检测结果不仅能够产生并检测到针对E2的中和抗体,同时能够在血清中检测到较高的干扰素‑γ以及能够检测到较强的淋巴细胞增殖反应。本发明构建的重组CHO细胞株不仅能够高表达E2‑IL1融合蛋白,而且可以实现抗原蛋白的无血清、大规模、稳定生产,该细胞株可以应用于猪瘟E2亚单位疫苗的研发。 |
