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一种利用福尔马林固定石蜡包埋样本快速构建RRBS测序文库的方法

基本信息

申请号 CN202111060933.6 申请日 -
公开（公告）号 CN113550013A 公开（公告）日 2021-10-26
申请公布号 CN113550013A 申请公布日 2021-10-26
分类号 C40B50/06（2006.01）I 分类 组合技术〔8〕;
发明人 谷红仓;王云飞;车仙荣;陶宛琪;钱飞箭 申请（专利权）人 杭州圣庭医疗科技有限公司
代理机构 杭州华鼎知识产权代理事务所（普通合伙） 代理人 魏亮
地址 311113浙江省杭州市余杭区良渚街道通运街362号11幢301室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种利用福尔马林固定石蜡包埋样本快速构建RRBS测序文库的方法，属于分子生物学领域，本发明包括如下步骤：步骤一，取石蜡包埋的组织样本，获得基因组DNA；用末端修饰酶加ddATP修复；步骤二，采用限制性内切酶消化基因组DNA的CpG岛；步骤三，用末端修饰酶对基因组DNA进行末端修复并在3’端加A‑Tailing；步骤四，用DNA连接酶进行甲基化接头连接，混合样本；步骤五，采用亚硫酸氢盐转化非甲基化胞嘧啶；步骤六，甲基化文库PCR富集；步骤七，切胶回收；本发明解决了现有技术福尔马林浸泡造成的RRBS构建FFPE DNA文库失败率高的问题，具有广大的应用前景和市场价值。