一种利用血液循环肿瘤DNA快速构建RRBS测序文库的方法
基本信息
| 申请号 | CN202111060927.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113604540A | 公开（公告）日 | 2021-11-05 |
| 申请公布号 | CN113604540A | 申请公布日 | 2021-11-05 |
| 分类号 | C12Q1/6806（2018.01）I;C12Q1/6886（2018.01）I;C12N15/10（2006.01）I;C40B50/06（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 谷红仓;王云飞;车仙荣;陶宛琪;钱飞箭 | 申请（专利权）人 | 杭州圣庭医疗科技有限公司 |
| 代理机构 | 杭州华鼎知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 魏亮 |
| 地址 | 311113浙江省杭州市余杭区良渚街道通运街362号11幢301室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种利用血液循环肿瘤DNA快速构建RRBS测序文库的方法，属于分子生物学领域，构建方法包括：步骤一，以血液样本获得ctDNA；用末端修饰酶对ctDNA的末端进行加ddATP修复；步骤二，采用限制性内切酶消化基因组DNA的CpG岛；步骤三，用末端修饰酶对基因组DNA进行末端修复并在3’端加A‑Tailing；步骤四，用DNA连接酶对DNA进行甲基化接头连接；步骤五，采用亚硫酸氢盐转化非甲基化胞嘧啶；步骤六，甲基化文库PCR富集；步骤七，切胶回收；本方法解决了现有技术利用血液进行RRBS构建ctDNA文库失败率高的问题，提高接头和酶切位点结合的效率，推进了液体活检技术的发展。 |
