一种宏基因组样本去宿主化提取试剂盒的使用方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种宏基因组样本去宿主化提取试剂盒的使用方法

基本信息

申请号	CN202010059725.3	申请日	-
公开（公告）号	CN111088249A	公开（公告）日	2020-05-01
申请公布号	CN111088249A	申请公布日	2020-05-01
分类号	C12N15/10	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	刘淑君;王春香	申请（专利权）人	泰州健为医学检验实验有限公司
代理机构	南京常青藤知识产权代理有限公司	代理人	黄胡生
地址	225300 江苏省泰州市中国医药城口泰路西侧、陆家路东侧G52幢59号四层西侧
法律状态	-

摘要

本发明提供一种宏基因组样本去宿主化提取试剂盒的使用方法，涉及生物检测领域，包括以下步骤：病原体富集：在1.5mL第一离心管中加入样本，于室温条件下离心5‑10min，除去上清液；宿主细胞裂解：在第一离心管中加入200‑1000μL裂解缓冲液Buffer G1，20‑40℃孵育10‑30min；宿主DNA去除：第一离心管于室温条件下离心2‑5min，除去上清液，向第一离心管中再次加入200‑500μL裂解缓冲液Buffer G1和1‑3μL全能核酸酶，30‑40℃孵育10‑30min，离心除去上清液，加入500‑1000μL Buffer G1清洗沉淀两次；微生物菌体破壁：加入100‑300μL溶菌酶重悬沉淀后将重悬液转移到装有玻璃珠的裂解管中，将裂解管置于30‑40℃孵育10‑30min，涡旋混匀处理5‑10min；微生物裂解和核酸提取。本发明应用范围广，兼容性好，提取效果好、效率高，成本低。