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一种G蛋白偶联受体对化合物特异性的检测方法

基本信息

申请号	CN201210301051.9	申请日	-
公开（公告）号	CN102839193A	公开（公告）日	2012-12-26
申请公布号	CN102839193A	申请公布日	2012-12-26
分类号	C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	任辉;黄斌;辛晓燕;韩蓝青;张曙光	申请（专利权）人	海狸（广州）生物科技有限公司
代理机构	广州市华学知识产权代理有限公司	代理人	海狸（广州）生物科技有限公司
地址	510663 广东省广州市广州科学城掬泉路3号国际企业孵化器D313
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种G蛋白偶联受体对化合物特异性的检测方法，该方法包括以下步骤：制备重组HEK-293细胞悬液；在细胞悬液中加入腔肠素，得到重组细胞液；将重组细胞液分为对照组和待测组，在待测组中加入待测化合物溶液，在对照组中加入Hank's平衡盐溶液；若待测组发出的荧光信号强度高于对照组，具有显著差异，则说明该待测化合物对重组的HEK-293细胞中的GPCR有激活作用，反之则无；继续在待测组中加入GPCR相应的激动剂，检测其荧光信号；若检测到的荧光信号强度显著低于对照组，则说明该待测化合物对重组的HEK-293细胞中的GPCR有抑制作用，反之则无。本发明所提供的方法是一种灵活可变的检测模式，不但可以通过已知GPCR来检测未知化合物，而且可以通过已知化合物来反向检测与其特异性结合的GPCR。