一种烤烟蚜传病毒多重复合PCR的检测方法

基本信息

申请号 CN202111193779.X 申请日 -
公开(公告)号 CN114703318A 公开(公告)日 2022-07-05
申请公布号 CN114703318A 申请公布日 2022-07-05
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/686(2018.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/94(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 祖庆学;李昊熙;聂忠扬;李宏江;林松;张翼飞;周建云 申请(专利权)人 贵州省烟草公司贵阳市公司
代理机构 长沙和雅知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 -
地址 550000贵州省贵阳市南明区中华南路45号华坤发展大厦23层23-4号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于植物病毒学检测技术领域,具体涉及一种烤烟蚜传病毒多重复合PCR的检测方法,包括以下几个步骤:(1)设计用于扩增黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)2种病毒基因片段的特异性引物;(2)提取样本总RNA;(3)含病毒RNA的烟草植物总RNA样品高温变性作为模板进行逆转录反应合成cDNA第一链;(4)利用单管多重PCR扩增反应得到PCR扩增产物;(5)将获得的PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。本检测体系通过一次PCR反应,就可以鉴定出复合侵染的多种病毒,适合基层检测站点快速和高效地鉴定大批量烟叶样品,为后续的被侵染烟株的提早发现和抗病毒遗传育种等病毒防控工作打下了基础。