肿瘤细胞中靶向性表达shRNA的真核表达载体

基本信息

申请号 CN200910044221.8 申请日 -
公开(公告)号 CN101993892A 公开(公告)日 2011-03-30
申请公布号 CN101993892A 申请公布日 2011-03-30
分类号 C12N15/85(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 易银沙;吕媛;孙永林;袁炳秋 申请(专利权)人 湖南能润医学诊断技术股份有限公司
代理机构 长沙正奇专利事务所有限责任公司 代理人 长沙赢润生物技术有限公司;易银沙;吕媛;孙永林;袁炳秋;湖南能润医学诊断技术股份有限公司
地址 410000 湖南省长沙市岳麓区银盆南路315号火炬城M3组团1栋3楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种肿瘤细胞中靶向性表达shRNA的真核表达载体,包括如下结构:1)由polII型启动子驱动的、将荧光蛋白基因与mirshRNA结构串联在一起的表达框结构;2)经过CMV增强子和SV40增强子增强的hTERT启动子;3)以mir30为基础的mirshRNA结构:mir30左臂-shRNA-mir30右臂,此mirshRNA结构可多个串联;4)Kan或者Amp抗性筛选标记;5)LR同源重组臂。利用本发明提供的方法构建上述shRNA真核表达载体,能够在肿瘤细胞中靶向性、特异性地表达单条或多条shRNA,在对肿瘤细胞进行RNA干扰、实行基因治疗的同时,又不影响正常细胞,解决了利用RNA干扰进行基因治疗时的非特异性干扰难题,有助于RNA干扰在肿瘤的基因治疗方面的研究和应用。