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用于快速筛选和鉴定有效shRNA的载体及其筛选和鉴定方法

基本信息

申请号	CN200910044738.7	申请日	-
公开（公告）号	CN102051371A	公开（公告）日	2011-05-11
申请公布号	CN102051371A	申请公布日	2011-05-11
分类号	C12N15/79(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	易银沙;吕媛;孙永林;袁炳秋	申请（专利权）人	湖南能润医学诊断技术股份有限公司
代理机构	长沙正奇专利事务所有限责任公司	代理人	湖南师范大学;湖南能润医学诊断技术股份有限公司
地址	410000 湖南省长沙市麓山路36号
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种快速筛选和鉴定有效shRNA真核表达载体，将如下结构构建至同一个真核表达载体上：1)由polIII型启动子调控的shRNA表达框结构，即polIII型启动子+shRNA插入位点；2)由CMV启动子调控的荧光蛋白表达框，并在荧光蛋白基因后面紧跟一个多克隆位点(MCS)；3)由SV40启动子调控的荧光蛋白表达框，该荧光蛋白的荧光颜色与第2)中的荧光蛋白的荧光颜色不同。本发明还提供了用上述载体筛选或验证有效shRNA的方案，利用此载体和方法筛选和鉴定有效shRNA，不需做RT-PCR或Western-blot检测，快速、简单、方便、成本低廉，特别适合于从多个预先设计的备选shRNA中筛选有效shRNA。